Gdy komórki, w których hodujemy

fabryka komóreksą zanieczyszczone, większość z nich jest trudna w obsłudze.Jeśli zanieczyszczone komórki są cenne i trudne do ponownego uzyskania, można zastosować poniższe metody, aby je usunąć.

1. Stosuj antybiotyki

Antybiotyki są skuteczniejsze w zabijaniu bakteriifabryki komórek.Leki skojarzone są skuteczniejsze niż same leki.Leki zapobiegawcze są skuteczniejsze niż leki stosowane po zakażeniu.W leczeniu zapobiegawczym na ogół stosuje się podwójny antybiotyk (penicylina 100u/ml plus streptomycyna 100 μg/ml).Po zanieczyszczeniu metoda czyszczenia musi być 5 do 10 razy większa niż zwykle.Lek należy stosować przez 24 do 48 godzin po dodaniu, a następnie zastąpić go zwykłym schematem.Płyn kulturowy.Metoda ta może być skuteczna we wczesnych stadiach skażenia.Oprócz penicyliny i streptomycyny do stosowanych antybiotyków można również zaliczyć gentamycynę, kanamycynę, polimyksynę, tetracyklinę, nystatynę itp. Powszechnie stosowane to kanamycyna w stężeniu od 400 do 800 µg/ml lub tetracyklina w stężeniu 200 µg/ml.Pożywkę zmienia się co 2–3 dni i przekazuje 1–2 pokoleniom w celu leczenia.W ostatnich latach doniesiono, że 4-fluoro, 2-hydroksychinolina (Ciprofloksacyna, Cip), pochodna pleu-romutyliny (pochodna pleu-romutyliny, BM-cyklina2: BM-1 i pochodna tetracykliny (BM-2)) Antybiotyki są skuteczny w zabijaniu mykoplazmy, stosowany samodzielnie lub w połączeniu.Wszystkie te trzy antybiotyki przygotowuje się w postaci 250-krotnie stężonych roztworów w PBS i przechowuje w temperaturze -20°C do późniejszego użycia.Stężenie użytkowe Cip wynosi 10 μg/ml, BM-1 to 10 μg/ml, a BM-2 to 5 μg/ml.Podczas stosowania najpierw odessać zanieczyszczoną pożywkę hodowlaną, dodać pożywkę hodowlaną RPMI1640 zawierającą BM-1, następnie po 3 dniach odessać pożywkę hodowlaną, dodać pożywkę hodowlaną RPMI1640 zawierającą BM-2 i hodować przez 4 dni i tak dalej przez 3 kolejne dni .rundach, dopóki mikroskopia fluorescencyjna 33258 nie udowodni, że mykoplazma została wyeliminowana, następnie dodaje się normalną pożywkę hodowlaną do hodowli i pasażu 3-4 razy.

2. Obróbka cieplna

Inkubacja zanieczyszczonej hodowli tkankowej w temperaturze 41°C przez 18 godzin może zabić mykoplazmę, ale ma niekorzystny wpływ na komórki.Dlatego przed zabiegiem należy przeprowadzić wstępne badanie, aby określić czas ogrzewania, który może zabić mykoplazmę w maksymalnym stopniu i mieć najmniejszy wpływ na komórki.Ta metoda jest czasami zawodna.Jeśli najpierw zostanie potraktowany lekami, a następnie podgrzany w temperaturze 41°C, efekt będzie lepszy.

3. Użyj surowicy specyficznej dla mykoplazmy

Zanieczyszczenie mykoplazmą można usunąć za pomocą 5% króliczej surowicy odpornościowej na mykoplazmę (miano hemaglutynacji 1:320 lub wyższe).Ponieważ specyficzne przeciwciało może hamować wzrost mykoplazmy, staje się ujemne po 11 dniach od leczenia surowicą odpornościową i pozostaje ujemne po 5 miesiącach.jest negatywny.Metoda ta jest jednak bardziej kłopotliwa i nie tak wygodna i ekonomiczna jak stosowanie antybiotyków.

4. Inne metody

Oprócz wyżej wymienionych metod usuwania zanieczyszczeń, istnieją również metody inokulacji i sterylizacji zwierząt, metody fagocytozy makrofagów, metody dodawania bromouracylu do zanieczyszczonychbutelki z kulturąi potem naświetlanie ich światłem, metodami filtracji itp., ale to wszystko jest bardziej kłopotliwe i nieskuteczne.Dlatego też, gdy dojdzie do skażenia mykoplazmą, jeśli nie ma ona szczególnie istotnej wartości, jest ona zazwyczaj odrzucana i ponownie hodowana.

prosimy o kontakt z Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709