• laboratorium-217043_1280

Metoda usuwania resztek komórkowych

Istnieje wiele fragmentów komórek po mechanicznej lizie zawiesiny komórek.Jak usunąć te fragmenty?Przyjrzyjmy się różnym podejśćom:

1. Zastosuj metodę rozcieńczania.Kiedy komórki zostaną rozcieńczone, mogą również się rozmnażać, będą stawały się coraz liczniejsze, a pozostałości komórek będzie odpowiednio coraz mniej.
2. Istnieje również osadnictwo naturalne.Komórki osiadają szybciej niż większość fragmentów: : Przenieść zawiesinę komórek doprobówka wirówkowai gdy większość komórek opadnie, górny roztwór można odessać, a następnie dodać do roztworu hodowlanego w celu zawieszenia komórek.Metodę tę można stosować wielokrotnie, przy czym za każdym razem możesz obserwować pod mikroskopem, czy spełnia ona Twoje wymagania.
3. Wirówka wolnoobrotowamoże usunąć zanieczyszczenia, zwykle 700 g, 5 minut
4. Podczas wirowaniapod warunkiem, że liczba komórek jest wystarczająca, skróć czas wirowania, na przykład 5 minut przy 1000 obr./min, zamiast 3 minut przy 1000 obr./min i usuń supernatant, ponieważ w supernatancie zazwyczaj znajdują się martwica i zanieczyszczenia!Czynność tę należy wykonać tylko raz podczas procesu płukania przed inkubacją!

Chociaż istnieje wiele sposobów usuwania resztek komórkowych, przekonasz się, że wirowanie jest jedną z najskuteczniejszych metod!

450

A ponieważ tkanki i komórki roślinne mają ściany komórkowe zbudowane z celulozy, hemicelulozy i pektyny, w tym celu na ogół konieczne jest zmielenie piasku kwarcowego lub proszku szklanego odpowiednim roztworem ekstrakcyjnym lub obróbka celulazą.Fragmentacja komórek bakteryjnych jest trudniejsza, ponieważ cały szkielet ściany komórkowej bakterii jest w rzeczywistości bardzo mocnym wiązaniem kowalencyjnym makrocząsteczek peptydoglikanu o charakterze torbielowatym.Do powszechnych metod rozbijania ścian komórkowych bakterii zalicza się kruszenie ultradźwiękowe, mielenie piaskiem, wytłaczanie pod wysokim ciśnieniem lub obróbka lizozymem.Po rozbiciu tkanki i komórek wybiera się odpowiedni bufor w celu ekstrakcji pożądanego białka.Materiały nierozpuszczalne, takie jak fragmenty komórek, są usuwane przezodwirowaćlub filtracja.

prosimy o kontakt z Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Czas publikacji: 24 lipca 2023 r